I laboratori di coltura cellulare sono progettati per prevenire la contaminazione microbica e gli effetti nocivi, richiedendo agli ambienti di lavoro di laboratorio di essere puliti, aria fresca, asciutta e senza fumo. Pertanto, il laboratorio di coltura cellulare dovrebbe prestare particolare attenzione al processo di pianificazione e progettazione.
Innanzitutto, il design del laboratorio
1. La coltura cellulare è una tecnica asettica che richiede che l'ambiente di lavoro e le condizioni siano privi di contaminazione microbica e altri fattori dannosi.
2, camera di coltura cellulare e principi di progettazione sono per prevenire la contaminazione microbica e fattori dannosi, che richiedono un ambiente di lavoro pulito, aria fresca, polvere secca e senza fumo.
3. Il principio di progettazione della stanza di coltura cellulare è generalmente che l'area operativa asettica si trova all'interno della stanza dove la stanza è meno mobile, e l'operazione convenzionale e la coltura chiusa sono in una stanza, che è una stanza pulita di 100.000 -ambiente pulito Il lavoro di lavaggio e disinfezione si trova all'esterno della camera bianca per evitare la contaminazione dell'ambiente interno. La cella pulita richiede un sistema di aria condizionata e mantiene una certa pressione positiva all'esterno.
4, il laboratorio di anatomia è utilizzato principalmente per la separazione dei tessuti degli organi, hanno bisogno di avere una tabella asettica, microscopio da dissezione, varie attrezzature chirurgiche.
In secondo luogo, attrezzature di laboratorio
1, banco da lavoro ultra pulito / armadio di sicurezza biologico
La coltura cellulare deve essere in un ambiente sterile. Quando si eseguono esperimenti cellulari, deve essere effettuato in aria al livello 100. Quindi è necessario acquistare un banco pulito o un armadietto per la biosicurezza in grado di fornire 100 livelli di pulizia.
Per la maggior parte dei laboratori, il banco da lavoro ultra-pulito è perfettamente in grado di soddisfare le esigenze operative del laboratorio. Per quanto riguarda le dimensioni della piattaforma ultra-pulita, dipende dalle dimensioni del laboratorio e dal numero di persone per determinare se si tratta di un singolo o di un doppio, se acquistare un lato o due lati e acquistare alcuni . Se l'operazione sperimentale è biologicamente pericolosa, dovresti scegliere un armadietto per la biosicurezza più avanzato rispetto al banco ultra clean.
2, incubatore di biossido di carbonio
Gli incubatori di anidride carbonica sono stati ampiamente utilizzati nella maggior parte delle camere di coltura cellulare. Il vantaggio dell'incubatore di anidride carbonica è che può fornire una certa quantità di CO2 (solitamente il 5%) necessaria per la coltura cellulare, ed è facile stabilizzare il pH della soluzione di coltura ed è adatto per colture aperte o semiaperte .
3, microscopio
I microscopi invertiti sono strumenti essenziali nel lavoro quotidiano dei laboratori di coltura cellulare. Sono principalmente utilizzati per comprendere la crescita delle cellule e osservare la presenza o l'assenza di inquinamento. Se i fondi lo consentono, si consiglia di utilizzare un microscopio a contrasto di fase di alta qualità, un microscopio da dissezione, un microscopio a fluorescenza, un sistema video o un dispositivo di ripresa time-lapse dotato di un sistema di telecamere per registrare e registrare la crescita cellulare in qualsiasi momento.
4, macchina dell'acqua pura / macchina dell'acqua ultra pura
La coltura cellulare richiede anche un sistema di acqua ultrapura. L'acqua pura ordinaria e l'acqua distillata non possono essere utilizzate per la coltura cellulare, mentre l'acqua ultrapura viene principalmente utilizzata per configurare un mezzo e un reagente. L'acqua di acqua ultrapura può essere acqua di rubinetto o pura secondaria. Acqua (acqua deionizzata di buona qualità, resistenza di circa 10 megaohm), oltre all'acqua di coltura cellulare ultra-pura, l'endotossina più importante ha requisiti rigorosi, quindi quando si seleziona una macchina ad acqua ultra pura, è necessario selezionare componenti ultra-filtranti . Modello.
5, centrifuga
La coltura cellulare richiede la centrifugazione per raccogliere le cellule di passaggio. La velocità di rotazione generale è compresa tra 1000 e 1500 giri / min, quindi è necessario acquistare una centrifuga a temperatura normale a bassa velocità e portare anche 10 ml, 50 ml e il rotore della piastra di coltura. È inoltre necessaria una centrifuga refrigerata ad alta velocità per raccogliere pellet cellulari o surnatanti cellulari.
6, serbatoio di azoto liquido
Per stabilire una banca cellulare è necessario un serbatoio di azoto liquido. Le cellule congelate in un serbatoio di azoto liquido possono generalmente garantire l'attività biologica negli ultimi dieci anni. Per quanto riguarda le dimensioni del serbatoio di azoto liquido, in base alle dimensioni del banco di celle. E impostare.
7, frigorifero a bassa temperatura
Le celle devono essere conservate a una temperatura compresa tra -70 e -80 gradi durante la notte per la crioconservazione e quindi collocate in un serbatoio di azoto liquido, che richiede un congelatore a bassa temperatura.
8, la finestra di trasferimento
La cellula dovrebbe essere isolata dal mondo esterno quando è costruita. Ciò richiede l'acquisto di una finestra di trasferimento per consegnare l'articolo, riducendo la possibilità di contaminazione e tutti gli elementi che entrano nella cella sono sterilizzati UV nella finestra di trasferimento per garantire la sicurezza della camera bianca.
9, autoclave
Tutti i tipi di utensili da laboratorio cellulari devono essere sterilizzati prima e dopo l'uso. Le condizioni di sterilizzazione sono generalmente 121 ° C per 20-30 minuti. Ciò richiede un'autoclave collocata in una stanza pulita per garantire la biosicurezza.
10, pistola per pipettare, pistola per pipetta elettrica
Nell'operazione di sperimentazione cellulare, sono necessari vari puntali e pipette, quindi è necessario configurare la pipetta.
11, tutti i tipi di materiali di consumo necessari nella coltura cellulare
Varie piastre di coltura cellulare, matracci di colture cellulari, pipette a piastre, ecc.
12, il resto dello strumento
Per gli esperimenti cellulari, possono essere necessari anche oscillatori e agitatori magnetici per miscelare liquidi; alcuni contenitori non pulibili in acciaio inossidabile o vetreria riempiti con celle richiedono l'aiuto di un pulitore a ultrasuoni; se sono coinvolti esperimenti immunologici, è assolutamente necessario il ghiaccio. Se la domanda di bagno e ghiaccio tritato è grande, è necessario acquistare una macchina per il ghiaccio. Inoltre, le cellule rotte potrebbero richiedere un distruttore cellulare ultrasonico. Infine, se la cella è grande, deve essere fornito un carrello. I liquidi liquidi sono sempre una cosa tormentosa.